ÖNEMLİ ÖZELLİKLER

Tam Ad	Corticotropin Releasing Hormone
Eşanlamlı	CRF,Corticoliberin
Test Tipi	Rekabetçi
Reaktivite	İnsan
Aralık	3.91-250pg/mL
Duyarlılık	2.35pg/mL
Örnek Tipi	Serum, plazma ve diğer biyolojik sıvılar
Örnek Hacmi	50μL
Tespit Dalga Boyu	OD450
Taşıma Sıcaklığı	2-8°C
Özgüllük	Kit, örneklerde İnsan CRH'sini tespit etti ve türler arası önemli reaksiyonlar bulunamadı
Mikroplaka	96 kuyulu plak, 12 x 8 kuyuluk şeritlere bölünebilir

TEST İLKESİ

Bu ELISA kiti, Rekabetçi ELISA prensibini kullanır. Bu kitte sağlanan mikro ELISA plakası, İnsan CRH ile önceden kaplanmıştır. Reaksiyon sırasında, numunedeki veya standarttaki İnsan CRH, katı faz destekçisindeki sabit miktarda İnsan CRH ile İnsan CRH'ye özgü Biyotinlenmiş Tespit Ab'si üzerindeki bölgeler için rekabet eder. Fazla konjugat ve bağlanmamış numune veya standart yıkanır ve her mikro plaka kuyusuna Avidin-Yaban Turpu Peroksidaz (HRP) konjugatı eklenir ve inkübe edilir. Ardından her kuyuya bir TMB substrat çözeltisi eklenir. Enzim-substrat reaksiyonu, durdurma çözeltisinin eklenmesiyle sonlandırılır ve renk maviden sarıya döner. Optik yoğunluk (OD), 450 nm ± 2 nm dalga boyunda spektrofotometrik olarak ölçülür. Test edilen numunelerdeki İnsan CRH konsantrasyonu, numunelerin OD'sinin standart eğri ile karşılaştırılmasıyla hesaplanabilir.

ELISA KIT BILEŞENLERİ

Teslim alındıktan sonra, talimatlarda önerildiği gibi derhal paketini açın ve depolayın.

Bileşenler	Teknik Özellikler	Depolama ve Notlar
Mikro Plaka	96T: 8 kuyu×12 şerit 48T: 8 kuyu×6 şerit	Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Aluminyum folyo torbasına geri koyun ve kapatın, -20°C'de saklayın.
Referans Standart	96T: 2 flakon 48T: 1 flakon	Açılmamış: -20°C, 12 ay Her deney için taze çözülmüş standartlar kullanın. Çözülmeden sonra kullanılmayan standartları atın.
Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Konsantresi (100×)	96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon	Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın.
HRP Konjugatı Konsantresi (100×)	96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon	Açılmamış: -20°C(Işık koruması), 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın.
Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Seyreltici	14mL×1 flakon	2-8℃, 12 ay
HRP Konjugatı Seyreltici	14mL×1 flakon	2-8℃, 12 ay
Referans Standart & Örnek Seyreltici	20mL×1 flakon	2-8℃, 12 ay
Yıkama Tamponu Konsantresi (25×)	30mL×1 flakon	2-8℃, 12 ay
Substrat Reajenti(TMB)	10mL×1 flakon	2-8°C(Işık koruması),12 ay
Durdurma Solüsyonu	7mL×1 flakon	2-8°C/Oda sıcaklığı

TEST PROSEDÜRLERİ

TİPİK VERİLER

İnsan CRH ELISA Standart Eğrisi

Tipik veriler yalnızca referans olarak sunulmuştur ve eğriler her deney için yeniden çizilmelidir. Uyarlama için Lojistik fonksiyon önerilir.

HASSASİYET

Test İçi Hassasiyet (Bir test içindeki hassasiyet): Test içi hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek bir plakada yirmi kez test edildi.

Testler Arası Hassasiyet (Testler arasındaki hassasiyet): Testler arası hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek yirmi ayrı testte test edildi. Testler, en az üç teknisyen tarafından iki parti bileşen kullanılarak gerçekleştirildi.

	Test İçi Hassasiyet			Testler Arası Hassasiyet
Örnek	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Ortalama (pg/mL)	12.93	36.34	105.57	13.34	39.17	95.47
Standart Sapma	0.69	1.77	5.55	0.83	1.62	3.29
CV(%)	5.35	4.87	5.26	6.22	4.14	3.45

GERİ DÖNÜŞÜM

Çeşitli matrikslerde test aralığının tamamında örneklerde üç farklı düzeye ekilen İnsan CRH'ün geri dönüşü değerlendirildi.

Örnek Tipi	Aralık (%)	Ortalama Gerçekleşme (%)
Serum(n=8)	85-97	91
EDTA plazması (n=8)	89-101	94
Hücre kültürü ortamı (n=8)	94-110	102

DOĞRULUK

Testin doğruluğunu değerlendirmek için, çeşitli matrikslerde yüksek konsantrasyonlarda İnsan CRH içeren ve/veya ilave edilmiş örnekler, testin dinamik aralığında değerlere sahip örnekler üretmek için Referans Standart & Örnek Seyrelticide seyreltildi.