ÖNEMLİ ÖZELLİKLER

Tam Ad	Cytochrome P450 2E1
Eşanlamlı	CPE1,CYPIIE1,P450-J,P450C2E,4-nitrophenol 2-hydroxylase,Cytochrome P450 Family 2 Subfamily E 1,Cytochrome P450,Subfamily IIE(Ethanol-Inducible)Polypeptide 1
Test Tipi	Sandviç
Reaktivite	İnsan
Aralık	0.78-50ng/mL
Duyarlılık	0.3ng/mL
Örnek Tipi	Serum, plazma ve diğer biyolojik sıvılar
Örnek Hacmi	100μL
Tespit Dalga Boyu	OD450
Taşıma Sıcaklığı	2-8°C
Özgüllük	Kit, örneklerde İnsan CYP2E1'i tespit etti ve türler arası önemli bir reaksiyon bulunamadı
Mikroplaka	96 kuyulu plak, 12 x 8 kuyuluk şeritlere bölünebilir

TEST İLKESİ

Bu ELISA kiti, Sandviç-ELISA prensibini kullanır. Bu kitte sunulan mikro ELISA plakası, İnsan CYP2E1'e özgü bir antikorla önceden kaplanmıştır. Standartlar veya numuneler mikro ELISA plakası kuyucuklarına eklenir ve özgül antikorla birleştirilir. Ardından, İnsan CYP2E1'e özgü biyotinlenmiş bir tespit antikoru ve Avidin-Yaban Turpu Peroksidaz (HRP) konjugatı her bir mikro plaka kuyucuğuna sırayla eklenir ve inkübe edilir. Serbest bileşenler yıkanır. Her bir kuyucuğa substrat çözeltisi eklenir. Yalnızca İnsan CYP2E1, biyotinlenmiş tespit antikoru ve Avidin-HRP konjugatı içeren kuyucuklar mavi renkte görünür. Enzim-substrat reaksiyonu, durdurma çözeltisinin eklenmesiyle sonlandırılır ve renk sarıya döner. Optik yoğunluk (OD), 450 nm ± 2 nm dalga boyunda spektrofotometrik olarak ölçülür. OD değeri, İnsan CYP2E1 konsantrasyonuyla orantılıdır. Numunelerdeki İnsan CYP2E1 konsantrasyonunu, numunelerin OD'sini standart eğri ile karşılaştırarak hesaplayabilirsiniz.

ELISA KIT BILEŞENLERİ

Teslim alındıktan sonra, talimatlarda önerildiği gibi derhal paketini açın ve depolayın.

Bileşenler	Teknik Özellikler	Depolama ve Notlar
Mikro Plaka	96T: 8 kuyu×12 şerit 48T: 8 kuyu×6 şerit	Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Aluminyum folyo torbasına geri koyun ve kapatın, -20°C'de saklayın.
Referans Standart	96T: 2 flakon 48T: 1 flakon	Açılmamış: -20°C, 12 ay Her deney için taze çözülmüş standartlar kullanın. Çözülmeden sonra kullanılmayan standartları atın.
Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Konsantresi (100×)	96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon	Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın.
HRP Konjugatı Konsantresi (100×)	96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon	Açılmamış: -20°C(Işık koruması), 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın.
Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Seyreltici	14mL×1 flakon	2-8℃, 12 ay
HRP Konjugatı Seyreltici	14mL×1 flakon	2-8℃, 12 ay
Referans Standart & Örnek Seyreltici	20mL×1 flakon	2-8℃, 12 ay
Yıkama Tamponu Konsantresi (25×)	30mL×1 flakon	2-8℃, 12 ay
Substrat Reajenti(TMB)	10mL×1 flakon	2-8°C(Işık koruması),12 ay
Durdurma Solüsyonu	7mL×1 flakon	2-8°C/Oda sıcaklığı

TEST PROSEDÜRLERİ

TİPİK VERİLER

İnsan CYP2E1 ELISA Standart Eğrisi

Tipik veriler yalnızca referans olarak sunulmuştur ve eğriler her deney için yeniden çizilmelidir. Uyarlama için Lojistik fonksiyon önerilir.

HASSASİYET

Test İçi Hassasiyet (Bir test içindeki hassasiyet): Test içi hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek bir plakada yirmi kez test edildi.

Testler Arası Hassasiyet (Testler arasındaki hassasiyet): Testler arası hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek yirmi ayrı testte test edildi. Testler, en az üç teknisyen tarafından iki parti bileşen kullanılarak gerçekleştirildi.

	Test İçi Hassasiyet			Testler Arası Hassasiyet
Örnek	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Ortalama (ng/mL)	2.61	5.94	21.93	2.71	6.14	23.75
Standart Sapma	0.15	0.24	1.06	0.17	0.32	0.8
CV(%)	5.6	4.04	4.85	6.44	5.19	3.38

GERİ DÖNÜŞÜM

Çeşitli matrikslerde test aralığının tamamında örneklerde üç farklı düzeye ekilen İnsan CYP2E1'ün geri dönüşü değerlendirildi.

Örnek Tipi	Aralık (%)	Ortalama Gerçekleşme (%)
Serum(n=8)	94-108	102
EDTA plazması (n=8)	91-105	96
Hücre kültürü ortamı (n=8)	90-100	95

DOĞRULUK

Testin doğruluğunu değerlendirmek için, çeşitli matrikslerde yüksek konsantrasyonlarda İnsan CYP2E1 içeren ve/veya ilave edilmiş örnekler, testin dinamik aralığında değerlere sahip örnekler üretmek için Referans Standart & Örnek Seyrelticide seyreltildi.