ÖNEMLİ ÖZELLİKLER
| Tam Ad | Protein Induced by Vitamin K Absence or Antagonist-Ⅱ |
|---|---|
| Eşanlamlı | Des-gamma carboxyprothrombin，DCP |
| Test Tipi | Sandviç |
| Reaktivite | İnsan |
| Aralık | 0.16-10ng/mL |
| Duyarlılık | 0.1ng/mL |
| Örnek Tipi | Serum, plazma ve diğer biyolojik sıvılar |
| Örnek Hacmi | 100μL |
| Tespit Dalga Boyu | OD450 |
| Taşıma Sıcaklığı | 2-8°C |
| Özgüllük | Kit, örneklerde İnsan PIVKA-Ⅱ'yi tespit etti ve türler arası önemli bir reaksiyon bulunamadı |
| Mikroplaka | 96 kuyulu plak, 12 x 8 kuyuluk şeritlere bölünebilir |
TEST İLKESİ
| Bu ELISA kiti, Sandviç-ELISA prensibini kullanır. Bu kitte sunulan mikro ELISA plakası, İnsan PIVKA-Ⅱ'ye özgü bir antikorla önceden kaplanmıştır. Standartlar veya numuneler mikro ELISA plakası kuyucuklarına eklenir ve özgül antikorla birleştirilir. Ardından, İnsan PIVKA-Ⅱ'ye özgü biyotinlenmiş bir tespit antikoru ve Avidin-Yaban Turpu Peroksidaz (HRP) konjugatı her bir mikro plaka kuyucuğuna sırayla eklenir ve inkübe edilir. Serbest bileşenler yıkanır. Her bir kuyucuğa substrat çözeltisi eklenir. Yalnızca İnsan PIVKA-Ⅱ, biyotinlenmiş tespit antikoru ve Avidin-HRP konjugatı içeren kuyucuklar mavi renkte görünür. Enzim-substrat reaksiyonu, durdurma çözeltisinin eklenmesiyle sonlandırılır ve renk sarıya döner. Optik yoğunluk (OD), 450 nm ± 2 nm dalga boyunda spektrofotometrik olarak ölçülür. OD değeri, İnsan PIVKA-Ⅱ konsantrasyonuyla orantılıdır. Numunelerdeki İnsan PIVKA-Ⅱ konsantrasyonunu, numunelerin OD'sini standart eğri ile karşılaştırarak hesaplayabilirsiniz. |
ELISA KIT BILEŞENLERİ
Teslim alındıktan sonra, talimatlarda önerildiği gibi derhal paketini açın ve depolayın.
| Bileşenler | Teknik Özellikler | Depolama ve Notlar |
|---|---|---|
| Mikro Plaka | 96T: 8 kuyu×12 şerit 48T: 8 kuyu×6 şerit | Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Aluminyum folyo torbasına geri koyun ve kapatın, -20°C'de saklayın. |
| Referans Standart | 96T: 2 flakon 48T: 1 flakon | Açılmamış: -20°C, 12 ay Her deney için taze çözülmüş standartlar kullanın. Çözülmeden sonra kullanılmayan standartları atın. |
| Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Konsantresi (100×) | 96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon | Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın. |
| HRP Konjugatı Konsantresi (100×) | 96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon | Açılmamış: -20°C(Işık koruması), 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın. |
| Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Seyreltici | 14mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| HRP Konjugatı Seyreltici | 14mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Referans Standart & Örnek Seyreltici | 20mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Yıkama Tamponu Konsantresi (25×) | 30mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Substrat Reajenti(TMB) | 10mL×1 flakon | 2-8°C(Işık koruması),12 ay |
| Durdurma Solüsyonu | 7mL×1 flakon | 2-8°C/Oda sıcaklığı |
TEST PROSEDÜRLERİ
TİPİK VERİLER
İnsan PIVKA-Ⅱ ELISA Standart Eğrisi
Tipik veriler yalnızca referans olarak sunulmuştur ve eğriler her deney için yeniden çizilmelidir. Uyarlama için Lojistik fonksiyon önerilir.
HASSASİYET
Test İçi Hassasiyet (Bir test içindeki hassasiyet): Test içi hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek bir plakada yirmi kez test edildi.
Testler Arası Hassasiyet (Testler arasındaki hassasiyet): Testler arası hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek yirmi ayrı testte test edildi. Testler, en az üç teknisyen tarafından iki parti bileşen kullanılarak gerçekleştirildi.
| Test İçi Hassasiyet | Testler Arası Hassasiyet | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Örnek | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Ortalama (ng/mL) | 0.54 | 0.99 | 3.58 | 0.53 | 0.92 | 3.75 |
| Standart Sapma | 0.03 | 0.06 | 0.15 | 0.03 | 0.04 | 0.13 |
| CV(%) | 6.07 | 6 | 4.2 | 5.5 | 4.82 | 3.54 |
GERİ DÖNÜŞÜM
Çeşitli matrikslerde test aralığının tamamında örneklerde üç farklı düzeye ekilen İnsan PIVKA-Ⅱ'ün geri dönüşü değerlendirildi.
| Örnek Tipi | Aralık (%) | Ortalama Gerçekleşme (%) |
|---|---|---|
| Serum(n=8) | 86-97 | 91 |
| EDTA plazması (n=8) | 91-106 | 98 |
| Hücre kültürü ortamı (n=8) | 93-107 | 98 |
DOĞRULUK
Testin doğruluğunu değerlendirmek için, çeşitli matrikslerde yüksek konsantrasyonlarda İnsan PIVKA-Ⅱ içeren ve/veya ilave edilmiş örnekler, testin dinamik aralığında değerlere sahip örnekler üretmek için Referans Standart & Örnek Seyrelticide seyreltildi.
