ÖNEMLİ ÖZELLİKLER
| Tam Ad | Hemoglobin |
|---|---|
| Eşanlamlı | HB |
| Test Tipi | Rekabetçi |
| Reaktivite | İnsan |
| Aralık | 6.17-500μg/mL |
| Duyarlılık | 2.27μg/mL |
| Örnek Tipi | Serum, plazma ve diğer biyolojik sıvılar |
| Örnek Hacmi | 50μL |
| Tespit Dalga Boyu | OD450 |
| Taşıma Sıcaklığı | 2-8°C |
| Özgüllük | Kit, örneklerde İnsan HB'yi tespit etti ve türler arası önemli reaksiyonlar bulunamadı |
| Mikroplaka | 96 kuyulu plak, 12 x 8 kuyuluk şeritlere bölünebilir |
TEST İLKESİ
| Bu ELISA kiti, Rekabetçi ELISA prensibini kullanır. Bu kitte sağlanan mikro ELISA plakası, İnsan HB ile önceden kaplanmıştır. Reaksiyon sırasında, numunedeki veya standarttaki İnsan HB, katı faz destekçisindeki sabit miktarda İnsan HB ile İnsan HB'ye özgü Biyotinlenmiş Tespit Ab'si üzerindeki bölgeler için rekabet eder. Fazla konjugat ve bağlanmamış numune veya standart yıkanır ve her bir mikro plaka kuyusuna Avidin-Yaban Turpu Peroksidaz (HRP) konjugatı eklenir ve inkübe edilir. Ardından her kuyuya bir TMB substrat çözeltisi eklenir. Enzim-substrat reaksiyonu, durdurma çözeltisinin eklenmesiyle sonlandırılır ve renk maviden sarıya döner. Optik yoğunluk (OD), 450 nm ± 2 nm dalga boyunda spektrofotometrik olarak ölçülür. Test edilen numunelerdeki İnsan HB konsantrasyonu, numunelerin OD'sinin standart eğriyle karşılaştırılmasıyla hesaplanabilir. |
ELISA KIT BILEŞENLERİ
Teslim alındıktan sonra, talimatlarda önerildiği gibi derhal paketini açın ve depolayın.
| Bileşenler | Teknik Özellikler | Depolama ve Notlar |
|---|---|---|
| Mikro Plaka | 96T: 8 kuyu×12 şerit 48T: 8 kuyu×6 şerit | Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Aluminyum folyo torbasına geri koyun ve kapatın, -20°C'de saklayın. |
| Referans Standart | 96T: 2 flakon 48T: 1 flakon | Açılmamış: -20°C, 12 ay Her deney için taze çözülmüş standartlar kullanın. Çözülmeden sonra kullanılmayan standartları atın. |
| Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Konsantresi (100×) | 96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon | Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın. |
| HRP Konjugatı Konsantresi (100×) | 96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon | Açılmamış: -20°C(Işık koruması), 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın. |
| Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Seyreltici | 14mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| HRP Konjugatı Seyreltici | 14mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Referans Standart & Örnek Seyreltici | 20mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Yıkama Tamponu Konsantresi (25×) | 30mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Substrat Reajenti(TMB) | 10mL×1 flakon | 2-8°C(Işık koruması),12 ay |
| Durdurma Solüsyonu | 7mL×1 flakon | 2-8°C/Oda sıcaklığı |
TEST PROSEDÜRLERİ
TİPİK VERİLER
İnsan HB ELISA Standart Eğrisi
Tipik veriler yalnızca referans olarak sunulmuştur ve eğriler her deney için yeniden çizilmelidir. Uyarlama için Lojistik fonksiyon önerilir.
HASSASİYET
Test İçi Hassasiyet (Bir test içindeki hassasiyet): Test içi hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek bir plakada yirmi kez test edildi.
Testler Arası Hassasiyet (Testler arasındaki hassasiyet): Testler arası hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek yirmi ayrı testte test edildi. Testler, en az üç teknisyen tarafından iki parti bileşen kullanılarak gerçekleştirildi.
| Test İçi Hassasiyet | Testler Arası Hassasiyet | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Örnek | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Ortalama (μg/mL) | 24.16 | 61.31 | 188.83 | 25.6 | 61.74 | 187.81 |
| Standart Sapma | 1.24 | 2.64 | 9.82 | 1.6 | 2.92 | 9.48 |
| CV(%) | 5.15 | 4.3 | 5.2 | 6.26 | 4.73 | 5.05 |
GERİ DÖNÜŞÜM
Çeşitli matrikslerde test aralığının tamamında örneklerde üç farklı düzeye ekilen İnsan HB'ün geri dönüşü değerlendirildi.
| Örnek Tipi | Aralık (%) | Ortalama Gerçekleşme (%) |
|---|---|---|
| Serum(n=8) | 93-108 | 98 |
| EDTA plazması (n=8) | 96-112 | 102 |
| Hücre kültürü ortamı (n=8) | 86-96 | 91 |
DOĞRULUK
Testin doğruluğunu değerlendirmek için, çeşitli matrikslerde yüksek konsantrasyonlarda İnsan HB içeren ve/veya ilave edilmiş örnekler, testin dinamik aralığında değerlere sahip örnekler üretmek için Referans Standart & Örnek Seyrelticide seyreltildi.
