ÖNEMLİ ÖZELLİKLER
| Tam Ad | Serotonin/5-Hydroxytryptamine |
|---|---|
| Eşanlamlı | 5HT,Enteramine,Thrombocytin,Thrombotonin,3-(β-Aminoethyl)-5-hydroxyindole |
| Test Tipi | Rekabetçi |
| Reaktivite | Evrensel |
| Aralık | 15.63-1000ng/mL |
| Duyarlılık | 9.38ng/mL |
| Örnek Tipi | Serum, plazma ve diğer biyolojik sıvılar |
| Örnek Hacmi | 50μL |
| Tespit Dalga Boyu | OD450 |
| Taşıma Sıcaklığı | 2-8°C |
| Özgüllük | Kit, numunelerde ST/5-HT tespit etti ve önemli türler arası reaksiyonlar bulunamadı |
| Mikroplaka | 96 kuyulu plak, 12 x 8 kuyuluk şeritlere bölünebilir |
TEST İLKESİ
| Bu ELISA kiti Rekabetçi ELISA prensibini kullanır. Bu kitte sağlanan mikro ELISA plakası ST/5-HT ile önceden kaplanmıştır. Reaksiyon sırasında, numunedeki veya standarttaki ST/5-HT, katı faz destekçisindeki sabit miktarda ST/5-HT ile Biyotinlenmiş Tespit Ab'sindeki ST/5-HT'ye özgü yerler için rekabet eder. Fazla konjugat ve bağlanmamış numune veya standart yıkanır ve her bir mikro plaka kuyusuna Avidin-Yaban Turpu Peroksidaz (HRP) konjugatı eklenir ve inkübe edilir. Ardından her bir kuyucuğa bir TMB substrat çözeltisi eklenir. Enzim-substrat reaksiyonu, durdurma çözeltisinin eklenmesiyle sonlandırılır ve renk maviden sarıya döner. Optik yoğunluk (OD), 450 nm ± 2 nm dalga boyunda spektrofotometrik olarak ölçülür. Test edilen numunelerdeki ST/5-HT konsantrasyonu, numunelerin OD'sinin standart eğriyle karşılaştırılmasıyla hesaplanabilir. |
ELISA KIT BILEŞENLERİ
Teslim alındıktan sonra, talimatlarda önerildiği gibi derhal paketini açın ve depolayın.
| Bileşenler | Teknik Özellikler | Depolama ve Notlar |
|---|---|---|
| Mikro Plaka | 96T: 8 kuyu×12 şerit 48T: 8 kuyu×6 şerit | Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Aluminyum folyo torbasına geri koyun ve kapatın, -20°C'de saklayın. |
| Referans Standart | 96T: 2 flakon 48T: 1 flakon | Açılmamış: -20°C, 12 ay Her deney için taze çözülmüş standartlar kullanın. Çözülmeden sonra kullanılmayan standartları atın. |
| Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Konsantresi (100×) | 96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon | Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın. |
| HRP Konjugatı Konsantresi (100×) | 96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon | Açılmamış: -20°C(Işık koruması), 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın. |
| Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Seyreltici | 14mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| HRP Konjugatı Seyreltici | 14mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Referans Standart & Örnek Seyreltici | 20mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Yıkama Tamponu Konsantresi (25×) | 30mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Substrat Reajenti(TMB) | 10mL×1 flakon | 2-8°C(Işık koruması),12 ay |
| Durdurma Solüsyonu | 7mL×1 flakon | 2-8°C/Oda sıcaklığı |
TEST PROSEDÜRLERİ
TİPİK VERİLER
Evrensel ST/5-HT ELISA Standart Eğrisi
Tipik veriler yalnızca referans olarak sunulmuştur ve eğriler her deney için yeniden çizilmelidir. Uyarlama için Lojistik fonksiyon önerilir.
HASSASİYET
Test İçi Hassasiyet (Bir test içindeki hassasiyet): Test içi hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek bir plakada yirmi kez test edildi.
Testler Arası Hassasiyet (Testler arasındaki hassasiyet): Testler arası hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek yirmi ayrı testte test edildi. Testler, en az üç teknisyen tarafından iki parti bileşen kullanılarak gerçekleştirildi.
| Test İçi Hassasiyet | Testler Arası Hassasiyet | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Örnek | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Ortalama (ng/mL) | 54.22 | 119.39 | 369.61 | 54.14 | 128.11 | 403.79 |
| Standart Sapma | 3.69 | 7.09 | 12.42 | 3.7 | 6.32 | 16.52 |
| CV(%) | 6.81 | 5.94 | 3.36 | 6.83 | 4.93 | 4.09 |
GERİ DÖNÜŞÜM
Çeşitli matrikslerde test aralığının tamamında örneklerde üç farklı düzeye ekilen Evrensel ST/5-HT'ün geri dönüşü değerlendirildi.
| Örnek Tipi | Aralık (%) | Ortalama Gerçekleşme (%) |
|---|---|---|
| Serum(n=8) | 88-103 | 95 |
| EDTA plazması (n=8) | 88-99 | 94 |
| Hücre kültürü ortamı (n=8) | 91-107 | 98 |
DOĞRULUK
Testin doğruluğunu değerlendirmek için, çeşitli matrikslerde yüksek konsantrasyonlarda Evrensel ST/5-HT içeren ve/veya ilave edilmiş örnekler, testin dinamik aralığında değerlere sahip örnekler üretmek için Referans Standart & Örnek Seyrelticide seyreltildi.
