ÖNEMLİ ÖZELLİKLER
| Tam Ad | Protease Activated Receptor 2 |
|---|---|
| Eşanlamlı | F2RL1,F2-RL1,GPR11,PAR2,Coagulation Factor II(thrombin)receptor-Like 1,G-protein coupled receptor 11,Thrombin receptor-like 1 |
| Test Tipi | Sandviç |
| Reaktivite | Fare |
| Aralık | 0.15-10ng/mL |
| Duyarlılık | 0.06ng/mL |
| Örnek Tipi | Serum, plazma ve diğer biyolojik sıvılar |
| Örnek Hacmi | 100μL |
| Tespit Dalga Boyu | OD450 |
| Taşıma Sıcaklığı | 2-8°C |
| Özgüllük | Kit, örneklerde Fare PAR2'yi tespit etti ve türler arası önemli bir reaksiyon bulunamadı |
| Mikroplaka | 96 kuyulu plak, 12 x 8 kuyuluk şeritlere bölünebilir |
TEST İLKESİ
| Bu ELISA kiti Sandviç-ELISA prensibini kullanır. Bu kitte sağlanan mikro ELISA plakası, Fare PAR2'ye özgü bir antikorla önceden kaplanmıştır. Standartlar veya numuneler mikro ELISA plakası kuyularına eklenir ve özgül antikorla birleştirilir. Ardından, Fare PAR2'ye özgü biyotinlenmiş bir tespit antikoru ve Avidin-Yaban Turpu Peroksidaz (HRP) konjugatı her bir mikro plaka kuyusuna sırayla eklenir ve inkübe edilir. Serbest bileşenler yıkanır. Her bir kuyuya substrat çözeltisi eklenir. Yalnızca Fare PAR2, biyotinlenmiş tespit antikoru ve Avidin-HRP konjugatı içeren kuyular mavi renkte görünür. Enzim-substrat reaksiyonu, durdurma çözeltisinin eklenmesiyle sonlandırılır ve renk sarıya döner. Optik yoğunluk (OD), 450 nm ± 2 nm dalga boyunda spektrofotometrik olarak ölçülür. OD değeri, Fare PAR2 konsantrasyonuyla orantılıdır. Örneklerdeki Fare PAR2 konsantrasyonunu, örneklerin OD'sini standart eğri ile karşılaştırarak hesaplayabilirsiniz. |
ELISA KIT BILEŞENLERİ
Teslim alındıktan sonra, talimatlarda önerildiği gibi derhal paketini açın ve depolayın.
| Bileşenler | Teknik Özellikler | Depolama ve Notlar |
|---|---|---|
| Mikro Plaka | 96T: 8 kuyu×12 şerit 48T: 8 kuyu×6 şerit | Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Aluminyum folyo torbasına geri koyun ve kapatın, -20°C'de saklayın. |
| Referans Standart | 96T: 2 flakon 48T: 1 flakon | Açılmamış: -20°C, 12 ay Her deney için taze çözülmüş standartlar kullanın. Çözülmeden sonra kullanılmayan standartları atın. |
| Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Konsantresi (100×) | 96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon | Açılmamış: -20°C, 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın. |
| HRP Konjugatı Konsantresi (100×) | 96T: 120μL×1 flakon 48T: 60μL×1 flakon | Açılmamış: -20°C(Işık koruması), 12 ay Kullanılmamış: Konsantresi kapatın ve -20°C'de saklayın, çalışma solüsyonunu atın. |
| Biotinileştirilmiş Tespit Antikor Seyreltici | 14mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| HRP Konjugatı Seyreltici | 14mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Referans Standart & Örnek Seyreltici | 20mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Yıkama Tamponu Konsantresi (25×) | 30mL×1 flakon | 2-8℃, 12 ay |
| Substrat Reajenti(TMB) | 10mL×1 flakon | 2-8°C(Işık koruması),12 ay |
| Durdurma Solüsyonu | 7mL×1 flakon | 2-8°C/Oda sıcaklığı |
TEST PROSEDÜRLERİ
TİPİK VERİLER
Fare PAR2 ELISA Standart Eğrisi
Tipik veriler yalnızca referans olarak sunulmuştur ve eğriler her deney için yeniden çizilmelidir. Uyarlama için Lojistik fonksiyon önerilir.
HASSASİYET
Test İçi Hassasiyet (Bir test içindeki hassasiyet): Test içi hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek bir plakada yirmi kez test edildi.
Testler Arası Hassasiyet (Testler arasındaki hassasiyet): Testler arası hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyonlara sahip üç örnek yirmi ayrı testte test edildi. Testler, en az üç teknisyen tarafından iki parti bileşen kullanılarak gerçekleştirildi.
| Test İçi Hassasiyet | Testler Arası Hassasiyet | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Örnek | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Ortalama (ng/mL) | 0.48 | 0.84 | 4.67 | 0.51 | 0.9 | 4.35 |
| Standart Sapma | 0.03 | 0.04 | 0.17 | 0.03 | 0.04 | 0.22 |
| CV(%) | 6.44 | 5.31 | 3.55 | 5.03 | 4.52 | 5.14 |
GERİ DÖNÜŞÜM
Çeşitli matrikslerde test aralığının tamamında örneklerde üç farklı düzeye ekilen Fare PAR2'ün geri dönüşü değerlendirildi.
| Örnek Tipi | Aralık (%) | Ortalama Gerçekleşme (%) |
|---|---|---|
| Serum(n=8) | 91-107 | 98 |
| EDTA plazması (n=8) | 95-111 | 101 |
| Hücre kültürü ortamı (n=8) | 89-100 | 94 |
DOĞRULUK
Testin doğruluğunu değerlendirmek için, çeşitli matrikslerde yüksek konsantrasyonlarda Fare PAR2 içeren ve/veya ilave edilmiş örnekler, testin dinamik aralığında değerlere sahip örnekler üretmek için Referans Standart & Örnek Seyrelticide seyreltildi.
Pathways associated with ELISA Kit
| Gene Expression Pathway | Gene Expression Pathway |
| Generic Transcription Pathway | Generic Transcription Pathway |
| Nuclear Receptor Transcription Pathway | Nuclear Receptor Transcription Pathway |
| Nuclear Receptors Pathway | Nuclear Receptors Pathway |
| Nuclear Receptors In Lipid Metabolism And Toxicity Pathway | Nuclear Receptors In Lipid Metabolism And Toxicity Pathway |
